木叶村的“三忍”之一，与自来也、纲手同为第三代火影猿飞日斩的弟子。擅长研究忍术且渴望得到写轮眼，闻名于忍界。具有不老不死的力量和惊人的再生能力。野心勃勃，由于目睹了太多人的死亡、知道生命是脆弱的而误入歧途，他认为人体中蕴含着一生都无法使用的力量，因此他想获得长生不老从而学习世间所有忍术，掌握世间的真理。
黑色长发，金色的纵长瞳孔，紫色延长到鼻翼的眼影，苍白的皮肤，带着青蓝色的勾玉状耳环。给人感觉阴险，即使进行了灵魂转生，他还是会伪装成原本的面貌。大蛇丸自幼父母双亡，六岁毕业于忍者学校后，与自来也、纲手一同成为猿飞日斩班的成员。
他被第三代火影评为“是个才华洋溢的少年，数十年才出现一个的天才”，因此得师父器重，也让自来也对其产生嫉妒之意，认为“猿飞老师心中只有大蛇丸一个”。因此在年幼时，他跟自来也的关系一直处于互相支持，同时也互相竞争的状态。因为看到了父母及同伴一个个的死亡，本身善良的大蛇丸感觉受到了生命的脆弱，感觉到人生的短暂，而大蛇丸本身热爱研究术，所以便开始研究不老不死之术以及复活亡者的术。
在第二次忍界大战中，大蛇丸和自来也、纲手曾联手跟雨隐村头目“山椒鱼半藏”对战。其他木叶忍者皆死伤枕籍，唯只有他们三人能支持到最后，半藏因而赐了他们“木叶三忍”的称号。大蛇丸当过御手洗红豆的老师，也曾经一度被认为是第三代火影的继承者。亦曾经担任根的成员，后来由于潜心研究禁术，并掳走村中忍者作为实验对象。令第三代火影及暗部注意上他的古怪行径。
木叶营地，地下一处秘密基地内，这里属于隔绝视线的存在，大蛇丸将五十具战死的雾隐村忍者的尸体和岩隐村、云隐村、砂隐村放在一起，大蛇丸嘴角一笑，自信的说道：“呵呵，这次实验对象就足够了，但是要是能有活人实验体就更好了。”大蛇丸刚说完，就听到耳边响起一个声音：“嘿嘿，这还不简单吗，大蛇丸前辈。”大蛇丸笑着说道：“日向信长，难道你不怕三代火影的责难吗？”日向信长说道：“呵呵，我信奉的是力量，想要存在保存完整就必须拥有力量，在这方面我自认为没有人能够胜的了我。”
大蛇丸说道：“很有道理，不尸转生需要的是活体，你能够弄到？”日向信长说道：“保护伞俘虏过大量的忍者，其中有一部分都被关押在木叶监狱内。”大蛇丸说道：“还有一部分，难道你还能带在身上不成？”日向信长说道：“呵呵，很巧的是，我还真有。”日向信长右手一伸，一到空间漩涡形成，然后三十名昏迷的云隐村忍者和砂隐村傀儡师纷纷从旋涡中掉出来。
大蛇丸一愣，然后说道：“你会空间忍术？”日向信长说道：“嗯，奇门遁甲。”大蛇丸说道：“就是二代火影大人留下来的八门遁甲？”日向信长说道：“不是，不一样，奇门遁甲之术其实就是空间忍术和体术结合的速度流忍体术，开启身体上的第九门九宫，便可使完全使用奇门遁甲，甚至比飞雷神更胜一筹。”大蛇丸说道：“我很期待。”日向信长说道：“前辈会有机会的。”
大蛇丸说道：“你是怎么知道我在这里的。”日向信长说道：“第六感。”大蛇丸说道：“这就是你能够感知任何事物的感知忍术吗？”日向信长说道：“第六感不属于五感范畴，是属于独立的个体，也就是第三只眼，在每一个人眉心都有一个类似于眼镜的存在，能够看起第六感的很少，就算是感知忍者也仅能开发出百分之十的能力，但是无法觉醒，想要觉醒除非是宇智波一族或者日向一族的，当然初代火影大人不算。”
大蛇丸说道：“也就是说，除非拥有宇智波一族的血统或者日向一族的血统，否则只能移植初代火影的细胞基因？”日向信长说道：“仙人之体和仙人之血脉是开启第六感的必备条件，反之能够移植到初代火影的细胞的话，也有可能开启第六感。”大蛇丸说道：“貌似很难的样子，不过这也是一个研究方向，不是吗！”日向信长说道：“难道已经开始了咒印？”大蛇丸说道：“刚刚开发出一种咒印，就是你之前融合到体内的生之咒印和死之咒印，不过这两种咒印普通人并不适合，看来只能找新的素材了。”
日向信长说道：“上次执行任务，发现过一个族群，被称之为先知族群，先天拥有吸收自然能量的力量，不过大部分族人无法控制能量而发生暴走已不在少数，我捕获过一名族人，目前已经改造成功，但是并不是咒印，而是傀儡印。”大蛇丸说道：“是一个绝好的素材。”
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